Мета роботи - встановити оптимальні параметри інтенсивності, тривалості безперервного УФ-випромінювання на фотодинамічне знебарвлення досліджуваних тканин підшлункової залози (ПЗ), а також на співвідношення інтенсивності корисного сигналу в зоні дослідження флуоресценції та інтенсивності неспецифічної флуоресценції фону. ПЗ трьох дорослих щурів лінії Wistar фіксували в розчині Буена (20 годин) і заливали в парапласт після стандартної гістологічної обробки. Дослідження здійснено на парафінових зрізах ПЗ, в яких імунофлуоресцентним методом визначено інсулін і глюкагон у панкреатичних острівцях за допомогою антитіл виробництва Santa Cruz Biotechnology. Реакцію імунофлуоресценції вивчено на мікроскопі AxioImager-M2. Для зйомки флуоресценції використали систему аналізу цифрових зображень AxioVision, а для кількісного аналізу зображення - систему аналізу зображень ImageJ. Проаналізовано 30 панкреатичних острівців площею 3000 - 5000 мкм<^>2 (8 - 13 % площі кадра). Висновки: під час імунофлуоресцентного дослідження ПЗ слід обирати помірний режим УФ радіації, корегувати експозицію CCD камери перед кожним кадром, а загальний час дослідження поля зору зразка обмежити 1 - 2 хвилинами. Для виділення ділянки дослідження інсуліну та глюкагону під час автоматичного аналізу рекомендовано застосовувати алгоритм Оцу. Для отримання кількісної оцінки середньої інтенсивності флуоресценції у сфері дослідження рекомендоване використання в розрахунках відношення логарифмів флуоресценції фону препарату та ендокриноцитів.

  Повний текст PDF - 1.384 Mb    Зміст випуску     Цитування публікації

  Якщо, ви не знайшли інформацію про автора(ів) публікації, маєте бажання виправити або відобразити більш докладну інформацію про науковців України запрошуємо заповнити "Анкету науковця"